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SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

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SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)正在出售的產品:DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細胞裂解液 A549(人非小細胞肺癌細胞) 原代平滑肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 猴腎細胞

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞) 詳細資料

細胞處理:

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)
1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)


SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

商品屬性SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

種屬

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

生長特性

半貼半懸

鑒定

STR鑒定正確

細胞形態(tài)

神經母細胞樣

編號

GOY-01X0437

商品介紹

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)

別稱 SK-N-BE2; SKNBE(2); SKNBE-2; SKNBE2; SK-N-BE; SKNBE

種屬 人類

年齡(性別) 男性,2

組織來源 腦;神經母細胞瘤,骨髓轉移灶

生長特性 半貼半懸

細胞形態(tài) 神經母細胞樣

參考資料(來源文獻)

SK-N-BE(2)神經母細胞瘤細胞株是于197211月從一位多次化療及放療的擴散性神經母細胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立的;SK-N-BE(2)細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。有報道稱,SK-N-BE(2)細胞的飽和濃度超過1×10^6細胞/cm^2SK-N-BE(2)細胞形態(tài)多樣,有的有長突觸、有的呈上皮細胞樣;SK-N-BE(2)細胞會聚集,形成團塊并浮起。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 MEM/F1210% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時間 ~36-48小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37

致瘤性 Yes, an inoculum of 1×10^7 cells produced tumors in cortisonized hamster cheek pouches with 18% frequency.

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。

(5)細胞懸液吸至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。

(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

(8)根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

(9)細胞凍存SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)


細胞接收后的處理:

SK-N-BE (2) (人神經母細胞瘤細胞)
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

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